MAPA DE BIOLOGIA MOLECULAR E FORENSE<\/p>\n
Estudante, seja bem-vindo \u00e0 atividade MAPA (Material de Avalia\u00e7\u00e3o Pr\u00e1tica de Aprendizagem) da disciplina de Biologia Molecular e Forense.<\/p>\n
Instru\u00e7\u00f5es iniciais
\n– Utilize o modelo padr\u00e3o de MAPA para realizar esta atividade. Ele se encontra em “Material da Disciplina”. Siga todas as instru\u00e7\u00f5es constantes nesse modelo.
\n– Assista ao v\u00eddeo com as instru\u00e7\u00f5es para a realiza\u00e7\u00e3o do MAPA, que foi disponibilizado na “Sala do Caf\u00e9”.
\n– Baixe a Planilha de Atividades (Planilha A e Planilha B) que est\u00e1 dispon\u00edvel em \u201cMaterial da Disciplina\u201d.<\/p>\n
CONTEXTUALIZA\u00c7\u00c3O
\nHemocromatose \u00e9 uma doen\u00e7a gen\u00e9tica causada por muta\u00e7\u00f5es no gene HFE que causam altera\u00e7\u00f5es no metabolismo do ferro, levando ao aumento da absor\u00e7\u00e3o intestinal e ac\u00famulo progressivo do metal em diferentes \u00f3rg\u00e3os. O excesso de ferro causa danos tecidual e fibrose com les\u00e3o irrevers\u00edvel e comprometimento funcional de v\u00e1rios \u00f3rg\u00e3os, entre os quais os mais comumente afetados s\u00e3o o f\u00edgado, o p\u00e2ncreas e o cora\u00e7\u00e3o<\/p>\n
Fonte: https:\/\/sbhepatologia.org.br\/fasciculos\/26.pdf. Acesso em: 8 abr. 2024.<\/p>\n
O QUE DEVE SER FEITO NESTA ATIVIDADE?
\nConsiderando essas informa\u00e7\u00f5es, imagine que voc\u00ea \u00e9 um cientista que acabou de isolar uma amostra de DNA de um paciente com suspeita de hemocromatose. Para saber se o gene HFE est\u00e1 presente nessa amostra, voc\u00ea pode utilizar uma sonda que tem a mesma sequ\u00eancia de parte do gene de interesse e um marcador, como um is\u00f3topo radioativo, que permite que a sonda seja detectada.<\/p>\n
Ao adicionar a sonda \u00e0 amostra, \u00e9 poss\u00edvel observar se ela hibridizar\u00e1 com alguma regi\u00e3o do DNA. Se a sonda \u00e9 hibridizada, ela aderir\u00e1 ao DNA da amostra, mas, se n\u00e3o, ela pode ser facilmente removida por lavagem. Ap\u00f3s enxaguar a sua amostra, voc\u00ea exp\u00f5e o material a um filme fotogr\u00e1fico para determinar se a sonda aderiu ao DNA e, quando examinar o filme, voc\u00ea saber\u00e1 se houve hibridiza\u00e7\u00e3o ou n\u00e3o, ou seja, se a sequ\u00eancia de DNA da sonda est\u00e1 presente tamb\u00e9m em sua amostra.<\/p>\n
Na planilha de atividades A, voc\u00ea tem uma sequ\u00eancia de DNA de 380 pares de bases (pb) que representa sua amostra. Toda d\u00e9cima base est\u00e1 em negrito, e a base no come\u00e7o de cada fita est\u00e1 numerada. Voc\u00ea tamb\u00e9m tem uma sequ\u00eancia pequena que corresponde a uma sonda para o gene da hemocromatose (HFE).<\/p>\n
*Voc\u00ea usar\u00e1 a sonda para determinar se o gene HFE est\u00e1 presente em sua amostra.<\/p>\n
Figura 1 \u2013 Planilha de atividades A
\nFonte: adaptada de: KREUZER, H.; MASSEY, A. Engenharia Gen\u00e9tica e Biotecnologia. 2. ed. Porto Alegre: Artmed, 2002.<\/p>\n
DESENVOLVENDO O TRABALHO
\nAp\u00f3s ler atentamente essas informa\u00e7\u00f5es, fa\u00e7a o que se pede:<\/p>\n
1. EXAMINE a sequ\u00eancia de DNA da amostra (planilha A) para ver se a sonda ser\u00e1 hibridizada a ela e, em seguida, RESPONDA se o gene da hemocromatose est\u00e1 presente ou n\u00e3o.
\n2. Se voc\u00ea encontrou um lugar onde a sonda poderia ser hibridizada, IDENTIFIQUE-O (grifar ou circular) na sequ\u00eancia de DNA da planilha de atividade A e, em seguida, ANOTE a sequ\u00eancia.
\n3. SIMULE a atividade de digest\u00e3o da sua amostra com a enzima de restri\u00e7\u00e3o SmaI (essa enzima corta a sequ\u00eancia de DNA 5\u2019 CCCGGG 3\u2019 entre o C e o G, no meio da sequ\u00eancia) e APONTE, com uma seta, todos os s\u00edtios de clivagem encontrados (planilha A).
\n4. INDIQUE quantos fragmentos de DNA resultaram ap\u00f3s a clivagem e os seus respectivos tamanhos.<\/p>\n
Na planilha de atividades B, utilize a mesma sequ\u00eancia de DNA da planilha A para responder aos objetivos das atividades 5 e 6.<\/p>\n
Figura 2 \u2013 Planilha de atividades B
\nFonte: adaptada de: KREUZER, H.; MASSEY, A. Engenharia Gen\u00e9tica e Biotecnologia. 2. ed. Porto Alegre: Artmed, 2002.<\/p>\n
5. Considerando a eletroforese de seus fragmentos, DESENHE o arranjo desses fragmentos de acordo com o seu tamanho no gel esquematizado na planilha B.
\n6. No gel, APONTE com um asterisco a banda que hibridizaria a sonda da planilha A.
\n7. REFER\u00caNCIAS: neste t\u00f3pico, insira as refer\u00eancias, nas normas da ABNT, que foram utilizadas para elaborar o seu MAPA.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
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